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解决方案
Trypsin Solution

Trypsin Solution

Trypsin,胰蛋白酶,经过 0.1μm 过滤除菌,是实验室细胞培养中解离贴壁细胞的经典试剂。

 

价格¥67.00
货号: SP00201 / SP00202 / SP00203 / SP00204 / SP00205 分类: ,

Trypsin Solution 产品详情

Trypsin,胰蛋白酶,一种丝氨酸水解酶,它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切段,水解细胞间的蛋白质,破坏细胞间的连接,从而使组织或贴壁细胞离散成单个细胞。胰酶溶液分散细胞的活性与组织或细胞的特性、胰酶浓度、温度和作用时间有关,在PH 8.0和37℃时,胰酶的作用能力最强,因此使用胰酶时,应把握好浓度、温度和时间,以免消化过度造成细胞损伤。

一般常用胰酶溶液的工作浓度为0.25%,而半贴壁细胞或对胰酶敏感的细胞常采用低浓度(0.05%)的胰酶进行细胞消化。EDTA能够螯合Ca2+和Mg2+,从而破坏细胞连接促进细胞的解离,因此在胰酶溶液中常常会加入一定量的EDTA混合使用,以增强解离效果。

产品为即用型,已经过滤除菌,可直接使用,使用前无需稀释或过滤除菌等任何处理,使用时应注意无菌操作,避免污染。

 


Trypsin Solution  产品优势

  • 活性保障: 严格控制酶活力,确保消化迅速、彻底,减少对细胞的机械损伤。
  • 规格多样: 提供 0.25%(常规型)与 0.05%(温和型)两种浓度,满足从坚韧组织到敏感细胞的不同消化需求。
  • 组分灵活:

           含 EDTA 组分: 加入螯合剂 EDTA,协同增强消化效果,特别适用于难消化的贴壁细胞。

           含酚红组分: 内置 pH 指示剂,方便通过颜色变化实时监测溶液状态。

  • 即开即用: 1X 工作液浓度,无需稀释,避免二次污染,保障实验的一致性。

Trypsin Solution 产品组分

指标 SP00201 SP00202 SP00203 SP00204 SP00205
外观 液体 液体 液体 液体 液体
溶剂 10 mM PBS 10 mM PBS 10 mM PBS 10 mM PBS 10 mM PBS
胰蛋白酶浓度 2.5 g/L 2.5 g/L 2.5 g/L 2.5 g/L 0.5 g/L
EDTA•2Na 0.2 g/L / 0.2 g/L / 0.2 g/L
酚红指示剂 / / 10 mg/L 10 mg/L 10 mg/L

 


Trypsin Solution 储存条件

储存条件:-5~-20℃避光保存

运输条件:冰袋 or 干冰

有效期:自生产之日起12个月

 

1. 使用胰蛋白酶时的注意事项有哪些?

消化时间控制:胰蛋白酶消化过长时间可能会损伤细胞,导致细胞膜受损或死亡。消化时间应根据细胞类型进行优化,通常为2-10分钟。胰蛋白酶中和:胰蛋白酶消化后,通常需要用含血清的培养基中和胰蛋白酶的活性,以防止继续消化细胞。


2. 胰蛋白酶对不同细胞类型的适用性如何?

适用性:胰蛋白酶适用于大多数贴壁细胞的消化和分离,尤其是哺乳动物细胞。然而,一些细胞(如干细胞或敏感细胞)可能对胰蛋白酶敏感,需要降低浓度或缩短消化时间。替代方法:对于非常脆弱的细胞,可能需要使用更温和的消化酶,如胶原酶或木瓜蛋白酶。


3. 如何判断胰蛋白酶消化是否完成?

显微镜观察:消化过程中,可以使用显微镜观察细胞是否已从培养瓶底部分离。一般贴壁细胞会圆形化并开始浮动,这时消化基本完成。及时中和:当细胞大部分脱离培养基底时,应立即加入含血清的培养基中和胰蛋白酶,防止过度消化。


4. 如何应对胰蛋白酶消化过程中出现的问题?

消化不完全:如果消化不完全,可以稍微延长消化时间或轻轻拍打培养瓶以加速细胞脱离。细胞损伤:如果发现细胞在消化后活性显著下降,可能需要缩短消化时间,或者尝试降低胰蛋白酶浓度。


5. 如何处理胰蛋白酶的污染?

避免污染:胰蛋白酶溶液应在无菌条件下制备和使用,并存放在无菌环境中。应对措施:如果发现胰蛋白酶污染,应立即丢弃受污染的溶液,并准备新的无菌胰蛋白酶。使用过程中,确保无菌操作,以防止细胞培养的交叉污染。


6. EDTA的浓度对胰蛋白酶消化有何影响?

EDTA的作用:EDTA通过螯合钙离子,破坏细胞间连接,帮助胰蛋白酶更有效地分离细胞。EDTA浓度通常为0.02-0.05 mM,可以显著增强胰蛋白酶的消化效果。

成分(胰酶浓度)

0.05%, 0.25%

成分(酚红)

含酚红, 不含酚红

成分(EDTA)

含EDTA, 不含EDTA

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