Transwell

细胞迁移和侵袭Cell migration and invasion 细胞迁移 (cell migration) 也称为细胞爬行、细胞移动或细胞运动，是指细胞在接收到迁移信号或感受到某些物质的梯度后而产生的移动。细胞迁移为细胞头部伪足的延伸、新的黏附建立、细胞体尾部收缩在时空上的交替过程。细胞迁移是正常细胞的基本功能之一，是机体正常生长发育的生理过程，也是活细胞普遍存在的一种运动形式。胚胎发育、血…

肿瘤细胞的主动运动是肿瘤进行转移的重要过程。肿瘤细胞在原发性肿瘤中迁移进入血管系统（侵袭和转移），但也需要主动成形以在新的宿主组织中离开血管内空间（外渗）。研究表明，肿瘤（和正常组织）细胞的定向或随机定向运动受pH调节影响。许多研究表明，如果细胞在中等酸性的pH（≈6.7）下培养，肿瘤细胞迁移增加。 那么，这种现象是通过什么实验观察到的呢 time-lapse microscopy transwe…

Transwell检测细胞迁移步骤 1. 饥饿处理细胞 2. 铺胶：将基质胶适当稀释，铺在上层小室中，聚合过夜。 3. 铺下室培养基：含20%FBS的培养基。 4. 制备细胞悬液：胰酶消化细胞，制备细胞悬液。 5. 铺细胞：将上层小室放入孔板中，细胞计数后将细胞铺在上层小室中。 6. 继续培养：细胞培养箱中培养，通常24或48h。 7. 擦去上层细胞：用棉签擦去上层小室中的细胞和基质胶。 8. 固…

1.给予细胞瞬时转染。24h后，PBS洗涤两次，消化，离心，去除培基，加入无血清的空培，重悬，计数。 2.8um孔径聚碳酸脂微孔滤膜的Boyden小室预先涂抹好50ul 1:40 RPMI-1640稀释的人工基质Matrigel胶，此操作应全程在冰上进行，因基质胶于室温下容易凝固。 3.预处理好的Boyden小室应置于37℃孵箱中凝固2h，使用前紫外线照射2h杀菌并加入适量无血清培养基，置于孵箱内…

实验原理 将细胞小室（Transwell小室）放入培养板中，小室内称上室，培养板内称下室，上室内盛装上层培养液，下室内盛装下层培养液，上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔。我们将细胞种在上室内，由于聚碳酸酯膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞，从而可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。 细胞小室（transwell） 应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜，就可以进行共培养、…

基本原理 将Transwell小室放入培养板中，小室内称上室，培养板内称下室，上室内盛装上层培养液，下室内盛装下层培养液，上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔。我们将细胞种在上室内，由于聚碳酸酯膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞，从而可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。 应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜，就可以进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多种方面的研究…