PCR
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细数荧光定量PCR中的8种对照
对照的目的是对检测的各个环节进行监控,因此我们按照检测的流程对对照进行梳理。常规荧光定量PCR的流程是:样品采集-运输-样品处理-核酸提取-反转录(RNA病毒)-扩增-结果读取。下面看看各个环节都可以使用哪些对照: 1.阳性对照(Positive control,PC)和阴性对照(Negative control,NC) 阳性对照和阴性对照是指在相同的处理条件下,比如一份已知的感染样品和一份已知的…
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实时荧光定量PCR探针法原
众所周知,目前主流的实时荧光定量PCR (Quantitative Real-time PCR)方法分为染料法和探针法,染料法以SYBR Green法为代表,SYBR Green染料游离时荧光微弱,但但一旦与双链DNA结合后,荧光大大增强,反应管中的荧光强度与反应管中双链DNA的数量成正比例关系,因此可以通过检测荧光计算反应管中产生的双链DNA(PCR产物)的量,但该方法没有特异性,非特异性扩增的…
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PCR实验中,这些点你get到了吗
PCR简介 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)技术是基因扩增技术的一次重大革新,是分子生物学发展史中的一个重要里程碑。自20世纪80年代初发展以来,因其具有敏感度高、特异性强、快速简便等特点,在分子生物学、医学、遗传学、法医学、微生物学、食品检验、卫生检验等众多领域中具有巨大的应用价值和广阔的发展前景。 PCR 技术发展史简图 二、PCR反应前注意事项 1…