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  • 细胞样本裂解方案

    技术中心, 蛋白免疫印迹 2021年8月29日

    Elisa(酶联免疫吸附测定)是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。样本的处理对实验来说比较重要,那么我们今天来探讨一下细胞样本是如何处理的。 01 贴壁细胞裂解方法 单层贴壁细胞总蛋白的提取: 1 倒掉培养液。 2 每瓶细胞加5ml 4℃预冷的PBS(0.01M pH7.2~7.3)。平放轻轻摇动1…

  • 经验交流:细胞蛋白裂解、提取、定量

    技术中心, 蛋白免疫印迹 2021年8月29日

    细胞蛋白是指的不是在细胞膜上就是在细胞里面,包括细胞质蛋白和细胞核蛋白,还会涉及胞浆蛋白和胞核蛋白的提取,所以我们提取蛋白的第一步是瓦解细胞膜,让蛋白释放出来,第二步才是提取蛋白,提取蛋白就包括是总蛋白还是核蛋白,第三步就是蛋白定量。 第一步是裂解细胞,目前细胞裂解细胞有反复冻融法、超声波处理法、裂解液处理法等。由于反复冻融法、超声波处理法在一定程度上会影响到细胞蛋白的完整性,所以目前用的最多的是…

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