细胞培养

1.细胞传代的方法都有哪些？根据不同的细胞采取不同的方法。贴壁生长的细胞用消化法传代；部分贴壁生长的细胞用直接吹打即可传代；悬浮生长的细胞可以采用直接吹打或离心分离后传代，或用自然沉降法吸除上清后，再吹打。 2.原代培养的首次传代应注意的问题？细胞没有生长到足以覆盖瓶底壁的大部分表面以前，不要急于传代；原代培养时细胞多为混杂生长，不同的细胞有不同的消化时间，因此要根据需要注意观察及时处理，并根据不…

1.如何正确选择培养基种类？ 培养基主要包括天然细胞培养基、合成细胞培养基和无血清细胞培养基等。 天然细胞培养基：是人们早期采用的细胞培养基，直接取自于动物组织提取液或体液，如血浆凝块、血清、淋巴液、胚胎浸出液等。水解乳蛋白和胶原是两种较好的天然培养基，富含氨基酸。血清是天然培养基中最有效和最常用的培养基，血清的来源有胎牛血清、小牛或成牛血清、马血清、鸡血清、羊血清及人血清，最广泛应用的为胎牛血清…

如何处理收到的细胞 1.新买的或惠赠的细胞如何处理？ 不管买的细胞、惠赠的细胞，刚拿到手应赶紧做这几件事：检测瓶子是否破裂；培养基是否漏出，是否浑浊；是否有支原体污染；迅速扩增冻存。2.能否使用与原先培养条件不同的培养基？ 不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应的细胞培养基，若骤然使用和原先提供培养条件不同的培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活。 3.购买的细胞死亡或存活率不佳可能原因？…

培养基 培养基是培养环境中最重要的组成部分，因为它为细胞生长提供了必要的营养、生长因子和激素，并调节培养物的pH值和渗透压。 尽管最初的细胞培养实验使用从组织提取物和体液中获得的天然培养基进行，但对标准化和培养基质量的需求不断增长，促进了化学成分确定的培养基的发展。培养基的三个基本类别分别是基础培养基、减血清培养基和无血清培养基，三种培养基对血清添加的要求有所不同。 基础培养基 大多数细胞系在含有…

细胞培养的一大优势在于能够控制细胞繁殖的物理化学环境（即温度、pH值、渗透压、O2和CO2 张力）和生理环境（即激素和营养浓度）。除温度外，培养环境由生长培养基控制。虽然细胞培养的生理环境不如其物理化学环境明确，但是通过更好地了解血清成分、确定增殖所需的生长因子以及更好地了解培养过程中的细胞微环境（即细胞间相互作用、气体扩散、细胞-基质相互作用），现在可以采用无血清培养基进行一些细胞系的培养。贴壁…

选择合适的细胞系 为自己的实验选择合适的细胞系时，请注意以下标准： • 种属：非人类和非灵长类动物细胞系的生物安全限制通常较少，但是否需要使用种属特异性的细胞培养物，则由所要开展的实验来最终决定。 • 功能特征：实验的目的是什么？例如，肝脏和肾脏来源的细胞系可能更适合用于毒性检测。 • 有限细胞系或连续细胞系：虽然选择有限细胞系会使您在表达正常功能方面具有更多的选择，但是连续细胞系往往更容易扩增和…

PH值 大多数正常的哺乳动物细胞系都能在pH值为7.4的环境中生长良好，而且不同细胞 株间差异极小。但是，目前发现有些转化细胞系在轻度偏酸性的环境（pH 7.0-7.4）中生长较好，而有些正常的成纤维细胞系更适合在轻度偏碱性的环境（pH7.4-7.7）中生长。Sf9和Sf21等昆虫细胞系在pH值为6.2的环境中生长情况最佳。 CO2 生长培养基可控制培养物的pH值，为培养细胞pH值的变化提供缓冲作…

细胞培养塑料表面 多年来，许多不同类型的塑料已用于细胞培养和基于细胞的检测。包括聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET）、高密度和低密度聚乙烯（PE）、聚氯乙烯（PVC）和聚丙烯 （PP），但目前实验室中最常用的塑料是聚苯乙烯（PS）。PS的低成本及其惰性化学性质使其成为一次性培养表面的最佳选择。在其纯粹形式下，PS是疏水性的，这非常适合悬浮细胞培养。但是，除造血细胞系和其他一些细胞外，大多数脊椎动物细胞均…

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，这些问题从细胞生长角度来说，针对细胞不贴壁、生长缓慢、生长不好，甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。 一、培养细胞不贴壁 可能原因： ●胰蛋白酶消化过度 ； ●支原体污染 ； ●培养基pH值过碱（NaHCO3分解）； ●细胞老化 ； ●接种细胞起始浓度太低或太高 。 解决方法：  ●缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度； ●分离培养物，检…

细胞培养板作为培养细胞的一种常用和重要的工具，其形状、规格、用途多样。你是否也为如何选择适合的培养板而迷茫？你是否正为如何方便、正确的使用培养板而苦恼？你对如何处理培养板是否也有困惑？对不同的培养板各有什么妙用你又有何体会？   细胞培养板的选择 1）细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底（U型和V型） 2）培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384、1536孔 3）根据材质的不同有Te…