抗体选择
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免疫组化(IHC)│常见问题及解析集锦
免疫组织化学(简称免疫组化)是组织化学的一种,它是利用已知的特异性抗体或抗原能特异性结合的特点,通过化学反应使标记于结合后的特异性抗体上的显示剂,如酶、金属离子、同位素等,显示一定的颜色,并借助显微镜观察其颜色的变化,从而在抗原抗体结合部位确定组织、细胞结构的化学成份或化学性质。 实验过程包括切片制作(固定,脱水,透明,包埋,切片,贴片,烤片),脱蜡,水化,阻断,抗原修复,封闭,一抗孵育,二抗孵育…
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实验专栏丨免疫组化结果分析这条大鱼,岂是说钓就钓的
很多时候,我们千辛万苦地染出了一张张漂亮的免疫组化片子。但是却不知道如何正确地分析,得出理想的结果。这实在是一件憾事。其实,免疫组化的protocol教科书和实验手册上面都有。不再重复了。这里,中洪君根据自己做免疫组化数年的经验和体会,谈谈应该注意的一些事项和技巧,并且有独门绝招献上。 免疫组化实验步骤 1. 石蜡切片置于67℃烘箱中,烘片2小时,脱蜡至水,用pH7.4的PBS冲洗三次,每次3分…
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当我们在用磷酸化抗体做WB时,应该注意什么?
“我的WB又没有杂出来,太桑心了” “哇靠你的WB又没有杂出来,用掉多少抗体了,还买进口的!” “哇靠你的WB又没有杂出来,却一直一轮又一轮的占用着蛋白电泳仪,我等到黄花都谢了!” 麦子说,这些声音贯穿了她整个研究生生涯,WB,虐了她无数遍,然而凤凰涅盘然后浴火重生,她从WB中参悟到了正确应对失败的人生道理。而在正确应对失败的同时,我们也要学会如何避免失败。小鱼今天给大家分享一下在用磷酸化抗体做W…
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一抗怎么选?需要考虑的都在这里
abcam是世界上最大的高品质抗体供应商之一,成立于1998年,总部位于英国的剑桥科学园,专门生产和分销研究型抗体,已有差不多十余万种抗体和试剂,并以每月上百种新产品的速度不断增加。在2012年,abcam 并购了美国的 Epitomics 公司,成为一家有领导地位的 RabMAbs® 供应商。 当搜索abcam网站,您会发现对于任何一种给定的目标抗原,都有不止一种有效抗体。如何筛选…
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PE,APC,PE-Cy5,流式抗体荧光该怎么选?
流式抗体荧光选择技巧: 在进行流式细胞仪多色分析时,如果想得到理想的分析结果,就需要选择好抗体的荧光搭配。常考虑的影响因素有以下几点: 01 荧光素的荧光强度 一个特定抗体,能否区分阴性与阳性结果,靠的是抗体上结合的荧光素标记。每一种荧光素的光量子释放能力不同,相对荧光强度不一样,一般用染色指数(staining index)来比较不同荧光标记的光信号强度。 染色指数是阳性信号和阴性信号差异与阴性…