包埋
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免疫组化(IHC)│常见问题及解析集锦
免疫组织化学(简称免疫组化)是组织化学的一种,它是利用已知的特异性抗体或抗原能特异性结合的特点,通过化学反应使标记于结合后的特异性抗体上的显示剂,如酶、金属离子、同位素等,显示一定的颜色,并借助显微镜观察其颜色的变化,从而在抗原抗体结合部位确定组织、细胞结构的化学成份或化学性质。 实验过程包括切片制作(固定,脱水,透明,包埋,切片,贴片,烤片),脱蜡,水化,阻断,抗原修复,封闭,一抗孵育,二抗孵育…
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实验专栏丨免疫组化结果分析这条大鱼,岂是说钓就钓的
很多时候,我们千辛万苦地染出了一张张漂亮的免疫组化片子。但是却不知道如何正确地分析,得出理想的结果。这实在是一件憾事。其实,免疫组化的protocol教科书和实验手册上面都有。不再重复了。这里,中洪君根据自己做免疫组化数年的经验和体会,谈谈应该注意的一些事项和技巧,并且有独门绝招献上。 免疫组化实验步骤 1. 石蜡切片置于67℃烘箱中,烘片2小时,脱蜡至水,用pH7.4的PBS冲洗三次,每次3分…
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新手需要了解的免疫组化攻略
基本原理 抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性,免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,通过免疫动物后获得特异性的抗体,再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的,因此还必须借助于组织化学的方法将抗原抗体结合的部位显示出来,以其达到对组织或细胞中的未知抗原进行定性,定位或定量的研究。 分类 1、免疫荧光方法 最…
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一文读懂,免疫组化原理及实验步骤
免疫组化,病理学实验的常用技术,看似容易,其实处处存在陷阱,稍微一不留意,就会掉入坑中而无法自拔。中洪免疫组化小王子:“是这个理,今天我就豁出去,将我多年的心得和经验奉献给你了!” (请耐心花2分钟阅读完本文,建议推荐给小伙伴一起学) 1 原理 抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),…