免疫荧光

技术原理及背景   蛋白质相互作用简介 生物体系的运作与蛋白质之间的相互作用密不可分，DNA合成、基因转录激活、蛋白质翻译、修饰和定位以及信息传导等重要的生物过程均涉及蛋白质复合体的作用。因此，发现和验证在生物体内的蛋白质与核酸、蛋白质与蛋白质之间的相互作用尤为重要。目前已发展出多种用于研究蛋白质-蛋白质之间相互作用的技术，如Pulldown技术、酵母双杂交技术（Y2H）技术、免疫共沉淀技术、噬菌…

以下文章来源于聊点学术 ，作者Mark 免疫荧光实验原理很简单，其实就是使用荧光二抗，并在荧光显微镜下采集图像，其它的和IHC或ICC区别不大。 但是，想要得到良好的结果却很难，大家经常会遇以下问题： （1）目标蛋白的荧光很弱，导致组间差异并不明显，造成假阴性结果； （2）蛋白荧光太强，甚至形成非特异性的标记，一些背景染色可能被误认为阳性区域，造成假阳性结果； （3）DAPI染细胞核时，加入的试剂…

在同一组织细胞标本上需要同时检测两种抗原时，需进行双重荧光染色。双重免疫荧光标记法(double immunofluorescence labeling method)也分为直接法和间接法。 (1)直接法双重免疫荧光标记：将标记有两种不同荧光素的抗体(如抗A和抗B)以适当比例混合，滴加在标本上孵育，然后洗去未结合的荧光抗体，在荧光显微镜下分别选择两种相应的激发滤片观察，即可对两种抗原进行定位和定量…

免疫荧光（Immunofluorescence）：简称IF，与western blotting一样，也是根据抗原抗体反应的原理，将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体或抗原上，与其相应的抗原或抗体结合后，在荧光显微镜下进行观察，从而确定抗原或抗体的性质和定位，包括直接法和间接法。 一、实验步骤 1. 样品准备（贴壁细胞、悬浮细胞以及组织等） （1）对于贴壁细胞：  先将洁净的盖玻片在70%乙醇中…

在同一组织细胞标本上需要同时检测两种抗原时，需进行双重荧光染色。双重免疫荧光标记法(double immunofluorescence labeling method)也分为直接法和间接法。 (1)直接法双重免疫荧光标记：将标记有两种不同荧光素的抗体(如抗A和抗B)以适当比例混合，滴加在标本上孵育，然后洗去未结合的荧光抗体，在荧光显微镜下分别选择两种相应的激发滤片观察，即可对两种抗原进行定位和定量…

导读:  免疫荧光技术是标记免疫技术中发展最早的一种．它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记抗体获得成功。经过几十年的发展，该技术已相当成熟。 免疫荧光技术（Immunofluorescence technique ）又称荧光抗体技术，是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。…

细胞铺板密度 上周和果子老师做了一次免疫荧光。我们按我常做的密度铺板，发现第二天细胞就非常满了，说明细胞在不同的实验室环境下生长状态是不一样的。所以建议大家在做细胞铺板时，自己要根据别人的建议摸一个最适的浓度。原则就是细胞一定是单层生长，不要太密。最后可以有单个细胞的存在。细胞只有呈单层并且健康生长时，结果才是比较可信的。因为细胞密集以后，细胞会抑制生长，有些促进凋亡的蛋白就会增加，细胞的周期也会…

免疫荧光技术是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。它是根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光基团，再用这种荧光抗体（或抗原）作为探针检查细胞或组织内的相应抗原（或抗体）。利用荧光显微镜可以看见荧光所在的细胞或组织，从而确定抗原或抗体的性质和定位，以及利用定量技术（比如流式细胞仪）测定含量。 一、免疫荧光原理简介 免疫荧光实验的主要步骤包括细胞片制备、固定及通透…

免疫荧光技术（Immunofluorescence technique ）又称荧光抗体技术，是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合，利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。它是根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光基团，再用这种荧光抗体（或抗原）作为探针检查细胞或组织…

免疫荧光技术是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。它是根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光基团，再用这种荧光抗体（或抗原）作为探针检查细胞或组织内的相应抗原（或抗体）。利用荧光显微镜可以看见荧光所在的细胞或组织，从而确定抗原或抗体的性质和定位，以及利用定量技术（比如流式细胞仪）测定含量。 免疫荧光实验的主要步骤包括细胞片制备、固定及通透（或称为透化）、封闭、…