免疫组化

免疫组织化学（简称免疫组化）是组织化学的一种，它是利用已知的特异性抗体或抗原能特异性结合的特点，通过化学反应使标记于结合后的特异性抗体上的显示剂，如酶、金属离子、同位素等，显示一定的颜色，并借助显微镜观察其颜色的变化，从而在抗原抗体结合部位确定组织、细胞结构的化学成份或化学性质。 实验过程包括切片制作（固定，脱水，透明，包埋，切片，贴片，烤片），脱蜡，水化，阻断，抗原修复，封闭，一抗孵育，二抗孵育…

很多时候，我们千辛万苦地染出了一张张漂亮的免疫组化片子。但是却不知道如何正确地分析，得出理想的结果。这实在是一件憾事。其实，免疫组化的protocol教科书和实验手册上面都有。不再重复了。这里，中洪君根据自己做免疫组化数年的经验和体会，谈谈应该注意的一些事项和技巧，并且有独门绝招献上。 免疫组化实验步骤 1.  石蜡切片置于67℃烘箱中，烘片2小时，脱蜡至水，用pH7.4的PBS冲洗三次，每次3分…

基本原理 抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性，免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来，以此作为抗原或半抗原，通过免疫动物后获得特异性的抗体，再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的，因此还必须借助于组织化学的方法将抗原抗体结合的部位显示出来，以其达到对组织或细胞中的未知抗原进行定性，定位或定量的研究。 分类 1、免疫荧光方法 最…

免疫组化，病理学实验的常用技术，看似容易，其实处处存在陷阱，稍微一不留意，就会掉入坑中而无法自拔。中洪免疫组化小王子：“是这个理，今天我就豁出去，将我多年的心得和经验奉献给你了！” （请耐心花2分钟阅读完本文，建议推荐给小伙伴一起学）  1 原理 抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，…

来源于体外诊断技术支持 在临床病理诊断中，免疫组织化学(IHC)是一种很重要的技术和手段，从20世纪70年代开始，免疫组化技术就应用于病理诊断，对于诊断肿瘤、肿瘤分类、判断预后产生了巨大的影响，同时也扩展了人们对于各种疾病及肿瘤形成过程的认识，提高了病理诊断与研究水平。但是，随着免疫组化的广泛应用，发现免疫组化技术存在一些局限性。深入研究免疫组化原理和技术，必须熟悉各种抗体真阳性反应部位，实现实验…

1.确定样本中磷酸化蛋白的表达量 对的样本，正确的处理方法和合适的阳性对照是实验成功的第一步。 对的样本：实验前需先查阅文献或通过预实验检测该样本是否表达，若该样本根本就不表达目的蛋白，那就不要浪费感情了吧； 正确的处理方法：若正常情况下样本的磷酸化水平过低或不表达，可通过物理或化学方法进行一定的刺激和诱导，刺激条件各不相同。但这并不代表刺激越多越好，充分但不过分（如磷酸化IRS1，仅需刺激5mi…

ICC/IF？IHC-P？IHC-Fr？IHC-FoFr？还有IHC-wmt？这些傻傻分不清楚？请看这篇文章，Abcam抗体有关IHC/ICC挑选，一篇说透。 免疫组织化学（IHC）和免疫细胞化学（ICC）有多种不同的实验方法，包括样品制备和/或染色方法的差别。每种实验方法都有一个常用的标准缩写。 Abcam在说明书上使用此标准缩写，来规定每种抗体或试剂适用的样品制备及染色类型，正如Abcam的A…