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  • 细胞样本裂解方案

    技术中心, 蛋白免疫印迹 2021年8月29日

    Elisa(酶联免疫吸附测定)是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。样本的处理对实验来说比较重要,那么我们今天来探讨一下细胞样本是如何处理的。 01 贴壁细胞裂解方法 单层贴壁细胞总蛋白的提取: 1 倒掉培养液。 2 每瓶细胞加5ml 4℃预冷的PBS(0.01M pH7.2~7.3)。平放轻轻摇动1…

  • 经验交流:细胞蛋白裂解、提取、定量

    技术中心, 蛋白免疫印迹 2021年8月29日

    细胞蛋白是指的不是在细胞膜上就是在细胞里面,包括细胞质蛋白和细胞核蛋白,还会涉及胞浆蛋白和胞核蛋白的提取,所以我们提取蛋白的第一步是瓦解细胞膜,让蛋白释放出来,第二步才是提取蛋白,提取蛋白就包括是总蛋白还是核蛋白,第三步就是蛋白定量。 第一步是裂解细胞,目前细胞裂解细胞有反复冻融法、超声波处理法、裂解液处理法等。由于反复冻融法、超声波处理法在一定程度上会影响到细胞蛋白的完整性,所以目前用的最多的是…

  • 实验专栏丨免疫组化结果分析这条大鱼,岂是说钓就钓的

    免疫组化, 技术中心 2021年8月29日

    很多时候,我们千辛万苦地染出了一张张漂亮的免疫组化片子。但是却不知道如何正确地分析,得出理想的结果。这实在是一件憾事。其实,免疫组化的protocol教科书和实验手册上面都有。不再重复了。这里,中洪君根据自己做免疫组化数年的经验和体会,谈谈应该注意的一些事项和技巧,并且有独门绝招献上。 免疫组化实验步骤 1.  石蜡切片置于67℃烘箱中,烘片2小时,脱蜡至水,用pH7.4的PBS冲洗三次,每次3分…

  • 一抗怎么选?需要考虑的都在这里

      abcam是世界上最大的高品质抗体供应商之一,成立于1998年,总部位于英国的剑桥科学园,专门生产和分销研究型抗体,已有差不多十余万种抗体和试剂,并以每月上百种新产品的速度不断增加。在2012年,abcam 并购了美国的 Epitomics 公司,成为一家有领导地位的 RabMAbs® 供应商。 当搜索abcam网站,您会发现对于任何一种给定的目标抗原,都有不止一种有效抗体。如何筛选…

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