产品详情
SP-RNA Transfection Reagent 是一款以纳米材料为基础的高效细胞转染试剂 RNA 专用转染试剂。转染操作可将小干扰 RNA（siRNA）直接递送至细胞中，其原理为带正电的阳离子通过电荷作用结合 siRNA 形成纳米复合物，并通过胞吞作用进入细胞。
应用范围
能够有效适用于多种类型细胞的 siRNA miRNA 转染，包括 HeLa，NIH-3T3，HEK-293，CHO-K1，和COS-7 和一些难转染细胞系。
转染流程
以下步骤以 24 孔板转染 siRNA 为例，所有试剂用量和体积均按每孔计算。
细胞铺板
贴壁细胞：转染前一日，每孔 0.5-2.0×105 个细胞接种于 500 µl 含抗生素的培养基中，转染时细胞长至 60%~80% 融合最佳。
转染复合物的制备
- 将SPERIKON-R 转染试剂放置于室温中，使用前轻轻混匀;
- 在无菌管中加入 50 µl 无血清培养基，并添加2 µl 转染试剂，用移液器轻轻混匀，室温静置 5 min ;
- 在另一无菌管中加入 50 µl 无血清培养基 ，并添加2 µl siRNA，用移液器轻轻混匀，室温静置 5 min ;
- 将SP-RNA Transfection Reagent 培养基混合物滴加至 siRNA 培养基混合物中，用移液器轻轻混匀， 室温静置 15~20 min 后，立即转染。
【注】：siRNA 一般推荐 20 µM 浓度保存, 2 µl 总量是 40 pmol。
【注】：制备转染复合物时需用无血清培养基稀释 DNA 和转染试剂，因为血清会影响复合物的形成。
转染过程
a. 在每孔细胞中加入 100 µl 转染复合物，轻轻摇匀。
b. 转染 6-8 小时后可更换成完全培养基。
c. 37℃培养 24-72 小时检测mRNA 表达，48-96 小时检测蛋白表达。
| 培养板 | 培养孔面积 | 接种培养液 | 稀释用无血清培养基 | siRNA 转染 | |
| siRNA | 转染试剂 | ||||
| 96 孔板 | 0.3 cm2 | 100 µl | 2×10 µl | 20 pmol | 1 µl |
| 24 孔板 | 2.0 cm2 | 500 µl | 2×50 µl | 40 pmol | 2 µl |
| 12 孔板 | 4.0 cm2 | 1 ml | 2×100 µl | 80 pmol | 4 µl |
| 6 孔板 | 10.0 cm2 | 2 ml | 2×200 µl | 150 pmol | 7.5 µl |
| 60 mm | 20.0 cm2 | 5 ml | 2×0.5 ml | 300 pmol | 15 µl |
| 10 cm | 60.0 cm2 | 15 ml | 2×1 ml | 600 pmol | 30 µl |
转染效果图：
图a: SP-RNA做siRNA基因转染试剂对比现有转染试剂结果，siRNA沉默荧火虫 荧光素酶蛋白。转染HeLa细胞
图b: SP-RNA做siRNA基因转染试剂对比现有转染试剂结果，siRNA沉默EGFP蛋白。转染HUH7细胞
图c: SP-RNA做siRNA基因转染试剂对比现有转染试剂结果，siRNA沉默EGFP蛋白。转染MCF7细胞
图d: SP-RNA做siRNA基因转染试剂对比现有转染试剂结果，siRNA沉默EGFP蛋白。转染MCF7细胞
储存条件
储存条件： 4°C 可保存 1 年，本产品已滤菌，使用前轻轻摇匀。 冬季寒冷，如果出现结冻的现象，要将本产品恢复至室温后使用。
运输条件：冰袋
有效期：12个月
