1. 什么是MEM培养基?
MEM(Minimum Essential Medium):是一种经典的细胞培养基,最初设计用于哺乳动物细胞的体外培养,特别适合贴壁细胞的生长。相比于其他培养基,MEM的营养成分较为基础。
2. MEM培养基的主要成分是什么?
成分特点:MEM包含基本的氨基酸、维生素、葡萄糖、无机盐和酚红等,但相较于DMEM、RPMI 1640等培养基,MEM的营养成分更少,适合基础需求的细胞培养。
选择性添加物:可根据实验需求添加非必需氨基酸(NEAA)、谷氨酰胺、丙酮酸钠和血清等。
3. MEM与DMEM、RPMI 1640等培养基的区别是什么?
营养成分:MEM提供的营养物质较为基础,适合营养需求较低的细胞,而DMEM、RPMI 1640等培养基包含更丰富的成分,适合快速增殖或复杂需求的细胞。
应用范围:MEM多用于传统细胞系(如HeLa细胞)的培养,而DMEM、RPMI 1640等应用更广泛,覆盖肿瘤细胞、免疫细胞等。
4. MEM的储存条件是什么?
储存温度:应保存在2-8°C的冰箱中,避免反复冻融。
光敏性:含有酚红的MEM应避免长期暴露在光线下以防止成分降解。
5. MEM培养基中是否需要添加血清?
通常需要:大多数细胞培养中,10%胎牛血清(FBS)是常见的添加成分,用于提供生长因子和其他营养物质。
6. MEM培养基中添加非必需氨基酸(NEAA)的作用是什么?
非必需氨基酸的作用:NEAA可以减少细胞自身合成这些氨基酸的代谢负担,促进细胞生长和繁殖,尤其对一些依赖这些氨基酸的细胞系有帮助。
7. 如何应对MEM中的pH变化?
CO2环境:保持细胞培养箱内的CO2浓度在5%以确保碳酸氢钠缓冲系统有效工作。
及时更换培养基:如果发现培养基颜色变黄(pH下降),应及时更换培养基。
8. MEM适用于哪些细胞类型?
常见适用细胞:MEM常用于传统的贴壁细胞系,如HeLa、L929、3T3等,也适合一些原代细胞培养。
9. 如何处理MEM培养基的污染?
避免污染:操作中严格遵守无菌技术,使用无菌过滤器(0.22 µm)过滤培养基以减少污染风险。
应对措施:一旦培养基污染,应立即丢弃污染的培养基,重新配制培养基并确保无菌操作。
10. MEM培养基的常见应用有哪些?
常见应用:MEM广泛应用于基础细胞生物学研究,如细胞生长特性研究、药物测试、细胞代谢研究等。