1. 什么是Ham's F-12K培养基?
Ham's F-12K培养基:Ham's F-12K(Kaighn's Modification of Ham's F-12)是一种特别修改的Ham's F-12培养基,设计用于培养对营养要求较高的细胞,尤其是人类和动物的成纤维细胞、上皮细胞和肿瘤细胞。
2. Ham's F-12K培养基的主要成分是什么?
成分特点:Ham's F-12K含有比原版F-12更高浓度的氨基酸、维生素、无机盐、葡萄糖和其他生长因子。这些成分有助于满足营养需求较高的细胞类型。培养基中也通常含有酚红作为pH指示剂。
配方特点:与Ham's F-12相比,F-12K含有调整后的钾、钙和镁离子浓度,以更好地支持特定细胞类型的生长。
3. Ham's F-12K与Ham's F-12、DMEM等培养基的区别是什么?
营养复杂性:Ham's F-12K培养基在营养成分方面更为丰富,特别适合对钙、镁、钾等离子浓度敏感的细胞类型。相比之下,Ham's F-12和DMEM应用范围更广,但对于特定细胞,F-12K提供了更优化的生长环境。
应用范围:Ham's F-12K培养基常用于培养人类乳腺癌细胞(如MCF-7)、前列腺癌细胞、气道上皮细胞和其他特定细胞系。
4. Ham's F-12K培养基的储存条件是什么?
储存温度:Ham's F-12K应保存在2-8°C的冰箱中,避免反复冻融。
光敏性:如果培养基含有酚红,避免长时间暴露在光线下,以防止成分降解。
5. Ham's F-12K培养基中是否需要添加血清?
通常需要:大多数细胞培养中需要添加胎牛血清(FBS),以提供生长因子和其他必需的营养物质。血清浓度通常为5-10%,但具体用量应根据实验需求调整。
6. Ham's F-12K中L-谷氨酰胺的重要性?
L-谷氨酰胺的作用:L-谷氨酰胺是细胞代谢和生长的重要成分,但在培养基中不稳定,容易降解。为了维持培养基的稳定性,可以选择使用稳定的谷氨酰胺替代品,如GlutaMAX。
7. 如何应对Ham's F-12K中的pH变化?
CO2环境:保持培养箱内5% CO2的环境,以确保碳酸氢钠缓冲系统有效运行,稳定培养基的pH。
及时更换培养基:如果培养基颜色变黄(表明pH值降低),应及时更换培养基。
8. Ham's F-12K适用于哪些细胞类型?
常见适用细胞:Ham's F-12K广泛用于培养如MCF-7乳腺癌细胞、前列腺癌细胞、气道上皮细胞以及其他营养需求较高的细胞。
9. 如何处理Ham's F-12K培养基的污染?
避免污染:操作中严格遵守无菌技术,使用无菌过滤器(0.22 µm)过滤培养基,以减少污染风险。
应对措施:如果发现培养基污染,应立即丢弃污染的培养基,重新配制并确保无菌操作。
10. Ham's F-12K培养基的常见应用有哪些?
常见应用:Ham's F-12K培养基常用于肿瘤细胞研究、上皮细胞培养和其他需要复杂生长条件的细胞类型的实验。