1. 什么是Ham's F-12培养基？
Ham's F-12培养基：是一种营养丰富的培养基，最初设计用于小鼠细胞的克隆研究，现广泛应用于多种哺乳动物细胞的培养，特别适合复杂营养需求的细胞，如卵巢细胞、成纤维细胞和肿瘤细胞。
2. Ham's F-12培养基的主要成分是什么？
成分特点：Ham's F-12含有多种氨基酸、维生素、无机盐、葡萄糖、核苷酸和酚红等成分，还可以根据需要添加L-谷氨酰胺、丙酮酸钠和血清。
配方特点：与其他培养基相比，Ham's F-12含有较高浓度的铁、锌、硒等微量元素，适合复杂营养需求的细胞系。
3. Ham's F-12与DMEM、RPMI 1640等培养基的区别是什么？
营养复杂性：Ham's F-12相比DMEM和RPMI 1640含有更高的微量元素和维生素，适用于营养需求较高的细胞培养，如卵巢细胞和一些原代细胞。
应用范围：Ham's F-12常与DMEM结合使用（如DMEM/F-12培养基），以支持更加多样化和复杂的细胞培养需求。
4. Ham's F-12培养基的储存条件是什么？
储存温度：Ham's F-12应保存在2-8°C的冰箱中，避免反复冻融。
光敏性：含有酚红的Ham's F-12应避免长时间暴露在光线下，以防止成分降解。
5. Ham's F-12培养基中是否需要添加血清？
通常需要：在大多数细胞培养中，需添加胎牛血清（FBS）以提供生长因子和其他必需的营养物质。血清浓度通常为5-10%，但可根据实验需求调整。
6. Ham's F-12中L-谷氨酰胺的重要性？
L-谷氨酰胺的作用：L-谷氨酰胺是细胞生长和代谢的关键，但在培养基中不稳定，容易降解。可以使用稳定的替代品，如GlutaMAX，以保持培养基的有效性。
7. 如何应对Ham's F-12中的pH变化？
CO2环境：保持细胞培养箱内5% CO2的环境，以确保碳酸氢钠缓冲系统的正常功能，维持培养基pH的稳定。
及时更换培养基：如果培养基颜色变黄（表明pH值降低），应及时更换培养基。
8. Ham's F-12适用于哪些细胞类型？
常见适用细胞：Ham's F-12适用于广泛的细胞类型，尤其是卵巢细胞（如CHO细胞）、成纤维细胞、肿瘤细胞和其他对营养要求较高的细胞。
9. 如何处理Ham's F-12培养基的污染？
避免污染：在操作中严格遵守无菌技术，使用无菌过滤器（0.22 µm）过滤培养基以减少污染风险。
应对措施：如发现污染，立即丢弃污染的培养基，重新制备并确保无菌操作环境。
10. Ham's F-12培养基的常见应用有哪些？
常见应用：Ham's F-12广泛用于培养卵巢细胞、成纤维细胞、乳腺癌细胞、原代神经元和其他高营养需求的细胞。它还常用于与DMEM混合以增强细胞培养的效果（如DMEM/F-12混合培养基）。
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