MEM (Minimum Essential Medium) 是一种较为常用的细胞培养基。MEM 可用于各种悬浮和贴壁的哺乳动物细胞的培养,包括 HeLa、BHK-21、293、HEP-2、HT-1080、MCF-7、成纤维细胞和原代大鼠星形胶质细胞等。
MEM含NEAA(非必须氨基酸)的培养基,是在MEM培养基的基础上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(门)冬酰胺、L-天(门)冬氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸和甘氨酸7种NEAA,能降低细胞培养时细胞自身生产非必须氨基酸的副作用,有效促进细胞增殖代谢。
L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(Alanyl-glutamine,Ala-Glu),又名丙氨酰谷氨酰胺、丙谷二肽,是一种高级细胞培养添加剂,可直接替代细胞培养基中的L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺(Glutamine)是细胞培养中所必需的一种营养素,但其在溶液中不稳定,会自发降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨对细胞有害;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的稳定,不会自发的降解。细胞利用其机制是:在细胞培养时,细胞会逐渐向培养液中释放一种肽酶,将L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,而后细胞会将这两种水解产物吸收利用。细胞利用L-丙氨酰-L-谷氨酰的过程与流加培养策略相似,连续的将低浓度水平的L-谷氨酰胺加入到培养液中,从而提高了L-谷氨酰胺的利用率,且不会生成多余的氨,更利于细胞的生长。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以代替等摩尔的L-谷氨酰胺,适用于所有的细胞,几乎无需适应,并且可以延长细胞的培养时间,减少传代次数,即节省了时间也节约了金钱。与添加 L-谷氨酰胺的培养基中培养的细胞相比,活性降低得更慢。 延滞期略微延长的原因是肽酶的释放和二肽的消化需要一定的时间。
MEM 是由 Harry Eagle 在其早期的 Basal Medium Eagle (BME) 配方基础上开发的。此后对 MEM 进行了许多其他改良,包括 Glasgow’s MEM、MEM α、DMEM 以及 Temin’s 改良培养基。MEM 含有 Earle’s 平衡盐用于 CO2 培养箱,或含有 Hanks' 平衡盐用于无 CO2 培养箱。该产品由 Earle’s 平衡盐制成。MEM 不含蛋白质、脂质或生长因子。因此,MEM 需要补充营养成分,通常需要添加 10% 胎牛血清 (FBS)。MEM 使用碳酸氢钠缓冲系统 (2.2 g/L),因此需要 5–10% CO2 的环境来维持生理 pH 值。
形态 | 液体 |
浓度 | 1× |
规格 | 500mL |
PH | 7.2~7.4 |
平衡盐 | Earle’s 盐 |
NEAA | 含 |
L-丙氨酰-L-谷氨酰胺 | 2mM |
NaHCO3 | 2200mg/L |
D-葡萄糖 | 1000mg/L |
HEPES缓冲剂 | 无 |
酚红指示剂 | 10mg/L |
储存条件 | 2~8℃,避光 |
运输条件 | 常温 |
有效期 | 12个月 |