Leibovitz's L-15

1. 什么是Leibovitz's L-15培养基？

Leibovitz's L-15培养基：L-15培养基是一种特殊设计的无CO₂环境培养基，适用于在开放式或低CO2环境中培养哺乳动物细胞。它最初设计用于支持各种细胞系在室温或低CO₂条件下的生长。

2. Leibovitz's L-15培养基的主要成分是什么？

成分特点：L-15培养基中含有高浓度的氨基酸、维生素、盐类和高糖浓度。它还含有牛磺酸、胱氨酸等补充成分，支持细胞在非CO₂培养条件下生长。

无碳酸氢盐：与大多数培养基不同，L-15培养基不依赖碳酸氢盐作为缓冲系统，因此无需在CO₂培养箱中使用。

3. Leibovitz's L-15与其他培养基（如DMEM、RPMI 1640）的区别是什么？

无CO₂需求：L-15培养基特别设计用于在开放系统中工作，无需CO2环境，而DMEM和RPMI 1640则需要在CO₂培养箱中使用。

缓冲系统：L-15依赖其他缓冲系统（如磷酸盐缓冲）来维持pH稳定，而不是碳酸氢盐缓冲。

4. Leibovitz's L-15培养基的储存条件是什么？

储存温度：L-15培养基应保存在2-8°C的冰箱中，避免反复冻融。

光敏性：如果培养基含有酚红，避免长时间暴露在光线下，以防止成分降解。

5. Leibovitz's L-15培养基中是否需要添加血清？

通常需要：大多数细胞培养需要添加胎牛血清（FBS）以提供生长因子和其他必需的营养物质。血清浓度通常为5-10%，但具体用量应根据实验需求调整。

6. Leibovitz's L-15中L-谷氨酰胺的重要性？

L-谷氨酰胺的作用：L-谷氨酰胺是细胞生长和代谢的重要成分，但在培养基中不稳定，容易降解。可以选择添加稳定的谷氨酰胺替代品，如GlutaMAX，以维持培养基的有效性。

7. 如何应对Leibovitz's L-15中的pH变化？

稳定性：由于L-15培养基不依赖CO₂环境，因此其pH相对稳定，在开放环境中更容易维持。

及时更换培养基：如果培养基颜色变黄（表明pH值降低），应及时更换培养基。

8. Leibovitz's L-15适用于哪些细胞类型？

常见适用细胞：L-15培养基广泛用于培养如猴肾细胞（LLC-MK2）、人类结肠癌细胞（HCT-116）、鱼类细胞和其他适合开放式培养系统的细胞。

9. 如何处理Leibovitz's L-15培养基的污染？

避免污染：操作中严格遵守无菌技术，使用无菌过滤器（0.22 µm）过滤培养基，以减少污染风险。

应对措施：如果发现培养基污染，应立即丢弃污染的培养基，重新制备并确保无菌操作环境。

10. Leibovitz's L-15培养基的常见应用有哪些？

常见应用：Leibovitz's L-15培养基常用于培养哺乳动物细胞和鱼类细胞，特别是在非CO₂环境或低氧条件下的细胞研究中。