分子克隆

PCR简介 聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）技术是基因扩增技术的一次重大革新，是分子生物学发展史中的一个重要里程碑。自20世纪80年代初发展以来，因其具有敏感度高、特异性强、快速简便等特点，在分子生物学、医学、遗传学、法医学、微生物学、食品检验、卫生检验等众多领域中具有巨大的应用价值和广阔的发展前景。 PCR 技术发展史简图 二、PCR反应前注意事项 1…

1. 引物设计的基本原则是什么？ 引物设计的下列原则供您参考： 1) 引物最好在模板cDNA的保守区内设计。 2) 引物长度一般在15-30碱基之间。 3) 引物GC含量在40%-60%之间，Tm值最好接近72℃。 4) 引物3′端要避开密码子的第3位。 5) 引物3′端不能选择A，最好选择T。 6) 碱基要随机分布。 7) 引物自身及引物之间不应存在互补序列。 8) 引物5′端和中间△G值应该相…