细胞培养

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，这些问题从细胞生长角度来说，针对细胞不贴壁、生长缓慢、生长不好，甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。 一、培养细胞不贴壁 可能原因： ●胰蛋白酶消化过度 ； ●支原体污染 ； ●培养基pH值过碱（NaHCO3分解）； ●细胞老化 ； ●接种细胞起始浓度太低或太高 。 解决方法：  ●缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度； ●分离培养物，检…

细胞培养板作为培养细胞的一种常用和重要的工具，其形状、规格、用途多样。你是否也为如何选择适合的培养板而迷茫？你是否正为如何方便、正确的使用培养板而苦恼？你对如何处理培养板是否也有困惑？对不同的培养板各有什么妙用你又有何体会？   细胞培养板的选择 1）细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底（U型和V型） 2）培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384、1536孔 3）根据材质的不同有Te…

HEPES（4-羟乙基哌嗪乙磺酸）是一种氢离子缓冲剂，pH值缓冲范围：6.8-8.2。我们在细胞培养过程中，经常少不了HEPES缓冲液。它是一种弱酸，在开放式的培养条件中，若加入HEPES，可防止培养基内pH氧化升高，从而将PH维持在7.0左右。HEPES缓冲液的使用终浓度为10-50mmol/L，对细胞无毒性作用。一般情况下，浓度为20mmol/L的HEPES即可达到缓冲能力。既然我们常用于细胞…

1）切记，细胞培养基的储存条件是2-8℃。如果细胞培养基不小心被冻，您应该融化培养基并观察是否有沉淀产生。如果没有沉淀产生，培养基可以正常使用，如果出现沉淀，只能丢弃这些培养基。 2）贮存在冰箱中的瓶口已开的培养基，可能在放置几天后颜色变紫。这主要是由于在暴露到周围的CO2水平时，碳酸氢钠导致了pH值的上升。您可以在使用前松开瓶口，在CO2培养箱孵育培养基10-15min，来校正溶液的pH值(确定…

组织培养：习惯上泛指所有的体外培养。根据培养物的不同可概括为三个不同概念：细胞培养、组织培养和器官培养。 A、细胞培养(cell culture)：将组织块用机械方法或酶解法分离成单个细胞，做成细胞悬液，再培养于固体基质上，成单层细胞生长，或在培养液中呈悬浮状态培养的技术。 B、组织培养(tissue culture)：将活体的一小片组织放在盛有培养液的玻璃或塑料培养器皿中，待组织块粘着后，沿底面…

细胞培养，看似简单的一个实验，却不知道把多少英雄豪杰折磨的意欲“自挂东南枝”~今天科研小助手就为大家盘点一下细胞复苏、传代到冻存的一些步骤和注意事项，希望广大科研汪能与细胞愉快的玩耍！ 细胞复苏 细胞复苏的原则－快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。 image 具体操作： 一. 实验前准备…

长期以来，人们认为中枢神经系统成熟的神经元很难或不能在进行分裂和增殖，属于终末分化细胞。因而中枢神经系统的损伤、变性导致的神经元丢失及缺损难以修复，神经功能的重建被视为几乎不可能。神经干细胞在体外分离培养和增殖的成功，为中枢神经系统再生和功能重建提供了新的可能途径。 “养细胞难、养原代细胞更难、养原代神经干细胞难上加难！” 今天，东澳金牌实验员为大家详细讲解原代神经干细胞取材及培养的那些事，手把手…

细胞培养过程中如果操作不当或者条件控制不合适见容易受到化学或者生物因素的污染，常见的污染源有： 一、细菌污染 细菌污染是实验室细胞培养中常见的污染，即使在细胞培养液中加入了抗菌素，也可能因为操作不慎而引起污染。最常见的有革兰氏阳性菌，如枯草杆菌以及大肠杆菌、假单胞菌等革兰氏阴性菌，其中又以白色葡萄球菌较常见。 培养细胞受细菌污染后，会出现培养液变混浊，pH改变。污染后细胞发生病理改变，胞内颗粒增多…