1.新买的或惠赠的细胞如何处理？
不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应的细胞培养基，若骤然使用和原先提供培养条件不同的培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活。
3.购买的细胞死亡或存活率不佳可能原因？
常见原因可能有：培养基使用错误或培养基品质不佳；血清使用错误或血清的品质不佳；解冻过程错误；冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心；悬浮细胞误认为死细胞；培养温度使用错误；培养箱气体浓度达不到要求；细胞置于–80 ℃太久。
1、收到的冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落的原因？
将冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，可佩戴防护眼镜和手套预防冷冻管的爆裂。取出冷冻管后，须立即放入 37 ℃水浴环境中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损害。并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。
3.细胞冷冻管解冻培养时，是否应马上去除DMSO？
现在大多数实验室会在解冻细胞后加培养液将DMSO出去，但也有研究者认为除少数特别注明对DMSO敏感的细胞外，绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞），在解冻之后，可直接放入含有10~15ml新鲜培养基的培养角瓶中，待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO即可，如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附的问题。
细胞冻存
1.冷冻培养基为什么要加DMSO？
因为细胞在不加任何保护剂的情况下直接冻存时，细胞内外的水分都会很快形成冰晶，冰晶的形成将造成细胞损伤，还可引起细胞的的死亡。目前多采用甘油和DMSO做保护剂。这两种细胞无明显毒性，分子量小，溶解度大，易穿透细胞，可以使冰点下降，提高包膜对水的通透性。
2.DMSO 的等级和无菌过滤的方式？
冷冻保存使用的DMSO等级，必须为 Tissue culture grade 的DMSO，其本身即为无菌状况，第一次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于4 ℃，避免反复冷冻解冻造成DMSO的裂解而释出有害物质，并可减少污染的机会。若要过滤 DMSO，则须使用耐 DMSO 的 Nylon 材质滤膜。
3.欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？
冷冻管内细胞数目一般为 1x106 cells/ml vial，融合瘤细胞则以 5x106 cells/ml vial 为宜。
4.冷冻保存细胞的方法？
冷冻保存方法一：
冷冻管置于4 ℃ 30~60 分钟 → -20 ℃ 30 分钟 → -80 ℃ 16~18 小时（或隔夜）→ 液氮槽 vapor phase 长期储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序的可程序降温机中每分钟降 1~3 ℃ 至 –80 ℃ 以下， 再放入液氮槽 vapor phase 长期储存。–20 ℃ 不可超过 1 小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入 –80 ℃ 冰箱中，存活率稍微降低一些。
5.细胞冻存太多会不会浪费？
每一种细胞系都应有充足的冻存储备，防止由于细胞污染等因素造成的细胞系的绝种，而且每一批次培养的细胞状态都不同，应该挑选几个状态较好的批次冻存保种。另外二倍体细胞等有限细胞系如果暂时不用应冻存以免传代太多，造成细胞衰老或者发生改变。
