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细胞培养入门指南-细胞系选择

选择合适的细胞系

为自己的实验选择合适的细胞系时,请注意以下标准:

• 种属:非人类和非灵长类动物细胞系的生物安全限制通常较少,但是否需要使用种属特异性的细胞培养物,则由所要开展的实验来最终决定。

• 功能特征:实验的目的是什么?例如,肝脏和肾脏来源的细胞系可能更适合用于毒性检测。

• 有限细胞系或连续细胞系:虽然选择有限细胞系会使您在表达正常功能方面具有更多的选择,但是连续细胞系往往更容易扩增和维持。

• 正常或转化的细胞系:转化细胞系通常生长速度快,接种效率较高,并且可以连续培养,培养基中需要的血清也较少,但是由于遗传转化,其表型已经发生了永生性变化。

• 生长条件和特性:您对细胞的生长率、饱和密度、克隆形成率以及悬浮生长能力有何要求?例如,要大量表达重组蛋白以获得高产量,您可能应选择生长迅速且能够悬浮生长的细胞系。

• 其他标准:如果您使用的是有限细胞系,您的细胞储备充足吗?细胞系的特性是否明确?需要自己进行验证吗?如果您使用的是异常细胞系,您是否有等效的正常细胞系可用作对照?细胞系稳定吗?如果不稳定,那么这种细胞容易扩增以便为实验提供充足的冻存储备吗?

获取细胞系

您可以通过原代细胞建立自己的培养细胞系,也可选择从商业供应商或者非盈利性供应商(即细胞库)处购买已经建立的细胞系。声誉良好的供应商提供优质的细胞系,此类细胞系经仔细地完整性检测,可确保培养物无污染物。建议不要从其他实验室借用培养物,因为它们有很高的污染风险。无论其来源如何,使用前均应确保所有新细胞系已经过支原体污染检测。
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