细胞培养入门指南-培养条件

PH值

大多数正常的哺乳动物细胞系都能在pH值为7.4的环境中生长良好，而且不同细胞 株间差异极小。但是，目前发现有些转化细胞系在轻度偏酸性的环境（pH 7.0-7.4）中生长较好，而有些正常的成纤维细胞系更适合在轻度偏碱性的环境（pH7.4-7.7）中生长。Sf9和Sf21等昆虫细胞系在pH值为6.2的环境中生长情况最佳。

CO₂

生长培养基可控制培养物的pH值，为培养细胞pH值的变化提供缓冲作用。通常，这种缓冲作用通过添加有机（例如HEPES）缓冲液或者CO₂ -HCO₃-（碳酸氢盐）缓冲液实现。培养基的pH值取决于溶解态CO₂与HCO₃-间的精密平衡，因此，空气中CO₂含量的变化会改变培养基的pH值。为此，使用含CO₂ -HCO₃-缓冲液的培养基时必须使用外源性CO₂ ，特别是使用开放式培养皿培养细胞或者需要在高浓度条件下进行细胞系培养时。虽然大多数研究人员通常使用的是空气中CO₂浓度为5-7%培养基，但是4-10%浓度的CO₂适用于大多数细胞培养实验。然而，每种培养 基均具有其推荐的CO₂张力和碳酸氢盐浓度，以便达到适当的pH值和渗透压；更多信息，请参阅培养基生产商提供的说明书。

温度

细胞培养的最佳温度主要取决于分离来源的细胞宿主的体温，此外也部分受到解剖部位体温差异的影响（例如皮肤温度可能低于骨骼肌的温度）。与温度过低相比，细胞培养时温度过高是更为严重的问题；因此，往往将培养箱的温度设定为略低于最佳温度的温度。

• 大多数人类和哺乳动物细胞系在36°C至37°C下具有最佳生长状态。

• 在27°C下培养是昆虫细胞的最佳生长条件；它们在较低温度和27-30°C之间的温度下生长较慢。高于30°C时，昆虫细胞的存活率降低，即使温度恢复到27°C，细胞也无法恢复。

• 禽类细胞系需要38.5°C才能实现最大程度的生长。尽管这些细胞在37°C时也可以进行培养，但它们的生长速度更慢。

• 源自冷血动物（例如两栖动物、冷水性鱼类）的细胞系可在15°C至26°C这一较 宽的温度范围内生长。

请注意，每种细胞类型的细胞培养条件各不相同。偏离特定细胞类型所需培养条件，可能导致异常表型的表达乃至细胞培养彻底失败等后果。因此，我们建议您熟悉您感兴趣的细胞系，并严格遵循实验所用每种产品的随附说明进行操作。