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细胞培养入门指南-培养耗材选择

细胞培养塑料表面

多年来,许多不同类型的塑料已用于细胞培养和基于细胞的检测。包括聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)、高密度和低密度聚乙烯(PE)、聚氯乙烯(PVC)和聚丙烯 (PP),但目前实验室中最常用的塑料是聚苯乙烯(PS)。PS的低成本及其惰性化学性质使其成为一次性培养表面的最佳选择。在其纯粹形式下,PS是疏水性的,这非常适合悬浮细胞培养。但是,除造血细胞系和其他一些细胞外,大多数脊椎动物细胞均具有贴壁依赖性,必须在表面上培养, 且该基质必须经过特殊处理,以便细胞附着和铺展,此类表面称为组织培养(TC) 处理的表面或经细胞培养处理的表面。该处理过程包括将PS表面暴露于等离子体气体中,等离子体气体会部分修饰和切割聚合物链,留下含氧官能团,如羟基和羧基。PS表面产生的负电荷使其更具亲水性,并改善了贴壁依赖性细胞的附着情况。通过对表面进行包被,可以进一步优化PS表面的特性,例如使用多肽(如多聚-D- 赖氨酸或PDL)、蛋白质(如胶原)或多糖。PDL是一种化学合成的聚阳离子细胞 外基质(ECM),可帮助介导细胞膜和表面的负电荷,从而促进细胞附着到经TC处理的塑料上。

ECM蛋白质(如胶原蛋白)为某些类型的细胞(在经TC处理的常规表面上生长有困难)的附着和生长提供了附着框架。I型胶原适用于内皮细胞、上皮细胞、肌肉细胞和肝细胞。IV型胶原是基底膜的主要组成成分,为细胞提供更具生理相关性的生长条件。

细胞培养容器

培养皿细胞培养皿是一次性的浅容器,专门设计用于支持培养细胞的生长和繁殖。有多种尺寸(单孔或多孔)可供选择,通常由PS或聚碳酸酯制成,从而可实现无失真显微镜观察。通常配有盖子,以提供持续的气体交换,同时提供环境保护。与培养瓶相比,使用培养皿时,从转染的细胞群中选择单个菌落要更为容易。

培养瓶:根据应用的不同,可采用未经处理、经TC处理或用其他材料处理的细胞培养瓶。培养瓶大小为12.5 cm2到300 cm2 不等,可以是直颈,也可以是弯颈。弯颈具有多个优点,包括使操作人员更容易接触到整个生长表面,有助于防止培养基接触到盖子,并允许从培养瓶中倒出培养基且减少滴落。

滚瓶:滚瓶是为疫苗工业规模生产、单克隆抗体和生物治疗等应用而开发的,由PS 或聚对苯二甲酸乙二酯(PETG)制成。与培养瓶相比,滚瓶具有更大的生长表面, 能够使培养基在细胞上缓慢而稳定地混合,并有助于增加培养基与表面的接触。

孔板:细胞培养板的孔数从4个到384个不等,可一次用于多种培养。根据应用的不同,细胞培养板有未经处理、经TC处理或用其他材料处理的培养板。对于TC板,仅处理孔的底部,保持壁的疏水性。经TC处理的孔板可为细胞附着和生长提供一致 且相容的表面。

培养腔室玻片:培养腔室玻片由一个可拆卸的培养基腔室组成,该腔室与一个经过处理用于贴壁细胞培养的玻片相连。它使您可以在单个显微镜载玻片上进行接种、培养、固定和染色。一些培养腔室玻片具有模拟PDL涂层特性的经化学修饰的生长表面。

试管:有多种用于培养、离心或储存细胞的试管。经TC处理的试管可用于培养,而锥形离心管可用于从样本储存到细胞分离等各种应用。

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