WB步步惊心之抗体选择！

市面上常见的抗体有进口品牌、国产品牌、进口品牌国内分装这几种类型。大部分进口品牌在抗体的质量、特异性、效价及保存条件方面较有保障。而有些国产品牌的抗体，在做Western Blot时，由于其特异性不高，导致实验结果出现背景不干净，非特异性条带多等问题。进口品牌国内分装则是个别经销商从厂家买到产品后，再通过稀释、分装、重新贴牌之后卖给客户，这样的抗体虽然价格相对便宜，但质量良莠不齐，批间差异较大。

要确保抗体的高质量，我们通常是选择可信赖的品牌，此外，还应注意抗体的供应商渠道是否正规，其供应链物流是否专业。综合这几方面因素，Sigma-Aldrich都是不错的选择。Sigma-Aldrich(sigmaaldrich.com)是国内最早实行电子商务的生命科学产品供应商，并以直销为主导，避免了中间流通环节的问题，加上其强大的物流体系，很大程度上降低了销售环节可能带来的实验风险。

优质抗体还应具备完善的验证数据和详细的信息标注，比如：是否明确标注其可以用于Western Blot、是否有足够的数据支持证明该抗体适用于某一组织或者样本、是否有明确的抗体建议稀释浓度、该抗体的识别位点是连续的氨基酸序列的一级结构还是非连续性氨基酸的三维结构位点……这些信息和数据的真实性及完整性是保证Western Blot实验顺利进行的关键。

关于这一点，HPA金标抗体 (sigma.com/prestige)及其所提供的数据是一个很好的案例。HPA抗体数据库覆盖了人类85%的蛋白，每支抗体均通过严格的抗原序列筛选及亲和层析纯化流程，确保其特异性和纯度。此外，每支抗体在多种组织样品中经过蛋白芯片、Western Blot、免疫组化、免疫荧光等实验的验证，并获得学术委员会的认证。作为重要的参考数据，所有的实验验证、发表文献和生物信息学预测都公布在 proteinatlas.org网站供大家免费查询。完善的实验数据支持可避免因信息不完整而造成的选择错误。